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細胞代謝和代謝組學

更新時間:2021-02-22 09:31:41


細胞代謝和代謝組學

Joshua D. Rabinowitz, PhD

Department of Chemistry, Princeton University

Princeton, NJ 08544 USA

同位素示蹤劑是代謝研究中重要的工具。為了測定培養(yǎng)哺乳動物細胞內(nèi)中心碳代謝途徑代謝通量,我們向動物細胞培養(yǎng)基中添加D -葡萄糖(13C6, 99%) (CLM-1396)L -谷氨酰胺(13C5, 99%) (CLM-1822)。細胞通過在同位素標記的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),其代謝物可以通過GC / MSLC / MS進行檢測。在傳統(tǒng)研究中,葡萄糖通常被認為是許多細胞,特別是癌細胞的主要碳源。然而,最近的研究表明,谷氨酰胺通常在三羧酸(TCA)循環(huán)中起主導作用。谷氨酰胺對三羧酸循環(huán)中四碳化合物的作用,可以通過對蘋果酸鹽和天門冬氨酸標記來檢測,而對三羧酸循環(huán)中二碳化合物的作用可以通過乙酰輔酶A和脂肪酸標記來檢測。檸檬酸是一種信息非常豐富的分子,在三羧酸循環(huán)中它對二碳化合物以及四碳化合物都有相關作用。使用質譜等現(xiàn)代化的儀器,可以同時測量所有這些所有同位素標記的化合物,從而實現(xiàn)系統(tǒng)級通量定量。這些方法也可以應用于生物體內(nèi)環(huán)境,在切除腫瘤或其他組織標本之前,給小鼠或患者注入同位素標記的營養(yǎng)素。代謝在生物工程和疾病病理生理學中具有非??傄囊馑迹彩沟猛凰卦谏锘瘜W科學中的得到越來越廣泛應用。




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Matthew Steinhauser, MD

Brigham and Women’s Hospital

Harvard Medical School



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